AVALIAÇÃO DO POTENCIAL PRÓ-COAGULANTE DOS PRODUTOS DE TERAPIA AVANÇADA BASEADOS EM CÉLULAS-TRONCO MESENQUIMAIS

INTRODUÇÃO: As células-tronco mesenquimais (CTM) são células multipotentes obtidas de diversas fontes como a medula óssea (MO). As CTM-MO são amplamente utilizadas na fabricação de Produtos de Terapia Avançada (PTA) como terapia para doenças crônicas como a doença do enxerto contra o hospedeiro (DECH). Na administração intravenosa as CTM podem ativar seu efeito pró-coagulante e a reação inflamatória instantânea mediada pelo sangue (IBMIR), aumentando o efeito trombótico e inflamação sistêmica. A análise de fatores de coagulação, como o fator tecidual (TF – CD142) e a fosfatidilserina (PS – Anexina V), é necessária para a verificação do efeito pró-coagulante. Além disso, parâmetros hematológicos podem estar relacionados direta ou indiretamente com a formação de trombos. Para mitigar qualquer risco de eventos adversos trombóticos nos pacientes e aumentar a segurança do tratamento, devem ser realizados estudos in vitro e acompanhamento com exames laboratoriais antes e após a infusão do PTA. OBJETIVOS: Determinar o potencial pró-coagulante do PTA baseado em CTM-MO que será utilizado no tratamento de pacientes com a DECH. MATERIAIS E MÉTODO: O projeto foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa (CEP) (PUCPR – CAAE: 68585123.1.0000.0020). Foram utilizadas cinco amostras de MO de doadores saudáveis, e oito pacientes com DECH crônica do Complexo Hospital de Clínicas da Universidade Federal do Paraná (CHC/UFPR). Antes da preparação do PTA, foi feita a avaliação da expressão da Anexina V e TF pela incubação das CTM-MO com os anticorpos conjugados com fluorocromos e análise por citometria de fluxo. Para os parâmetros do hemograma, foram realizadas coletas de sangue nos tempos: pré-infusão, dias 7, 14, 28, 60, 82, 180, e 260. Os parâmetros avaliados do hemograma foram: eritrócitos, eosinófilos, neutrófilos, linfócitos, monócitos, plaquetas e VPM. Os dados foram analisados por teste t pareado e não pareado e foi considerado significância estatística resultados com p < 0,05. RESULTADOS: As CTM-MO apresentaram médias percentuais de 0,92% para Anexina+ e 3,69% para CD142+, mostrando baixa presença de PS na superfície celular, baixa taxa de apoptose e baixa atividade pró-coagulante. Na análise estatística pareada, não foram encontradas alterações significativas nos parâmetros hematológicos, sugerindo que a infusão do PTA não causou efeitos significativos. A análise não pareada mostrou diferença estatística nos níveis de eritrócitos e monócitos nos dias 82 e 260, respectivamente, com aumento das médias após infusão, sinalizando possível influência da infusão do PTA no perfil hematológico dos pacientes. CONSIDERAÇÕES FINAIS: O perfil de segurança das CTM-MO utilizadas reforçam que não houve evidência de reações hematológicas graves ou risco trombogênico direto. A avaliação conjunta dos biomarcadores celulares e das respostas hematológicas dos pacientes foram úteis para melhorar os critérios de controle de qualidade e segurança dos PTA. Este estudo reforça a importância do monitoramento laboratorial contínuo em pacientes submetidos à terapia celular.

PALAVRAS-CHAVE: Hemocompatibilidade; Anexina V; Fator Tecidual; Terapia Celular; Parâmetros hematológicos.