DESENVOLVIMENTO DE ESFEROIDES PARA O ESTUDO DA MIGRAÇÃO CELULAR NO NEUROBLASTOMA

INTRODUÇÃO: O neuroblastoma (NB) é o tumor sólido extracraniano mais comum na infância, respondendo por cerca de 15% das mortes por câncer pediátrico. Sua progressão está fortemente associada à interação entre as células tumorais e o microambiente tumoral (MAT), especialmente os fibroblastos associados ao câncer (FACs). Modelos tridimensionais, como os esferoides tumorais multicelulares (ETMC), reproduzem com maior fidelidade essas interações do que o cultivo bidimensional convencional. OBJETIVOS: Desenvolver esferoides heterotípicos de NB para o estudo da migração celular em NB. MATERIAIS E MÉTODO: Os esferoides foram produzidos pelo método de sobreposição líquida em placas de baixa aderência. Três grupos experimentais foram definidos – monocultivo; heterotípico com HFF-1; e com adição de colágeno tipo I a 3 µg/mL. Por fim, três densidades celulares (2.000, 3.000 e 4.000 células por poço) foram testadas. Os esferoides foram monitorados por sete dias e analisados quanto à área, perímetro, circularidade e solidez utilizando processamento digital de imagens capturadas nos dias 1, 3 e 7. RESULTADOS: Os grupos monocultivo e heterotípico formaram esferoides progressivamente mais compactos, circulares e estáveis ao longo do cultivo. O desempenho mais favorável foi nas densidades de 3.000 e 4.000 células associadas à presença de fibroblastos HFF-1. A adição de colágeno tipo I em suspensão livre não promoveu a formação de um agregado único, resultando em múltiplos agregados que se tornaram gradualmente mais organizados ao longo dos sete dias de cultivo. CONSIDERAÇÕES FINAIS: O protocolo padronizado estabelece uma base metodológica consistente para a continuidade do estudo da migração e invasão celular no neuroblastoma, contribuindo para a compreensão do papel do estroma fibroblástico na progressão tumoral.

PALAVRAS-CHAVE: Neuroblastoma; Esferoides tumorais; Migração celular; Fibroblastos associados ao câncer.